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商品の詳細:
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| プロダクト: | BsaI | 設計された制限の酵素: | 5-15分の急速なDNAの消化力 |
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| 場所の切断: | 3' - CCAGAG （N） 5↑-5 ' | 孵化させなさい: | 37℃. |
| 熱不活性化: | 20分の80℃ | 推薦された反作用の状態: | 1× FuniCut™の緩衝;37℃で孵化させなさい。 |
| ハイライト: | DNAの消化力15Minの酵素BsaI,急速なDNAの消化力の酵素BsaI,酵素のBsaIの生化学的な試薬 |
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酵素BsaI
酵素は5-15の最少酵素の急速なDNAの消化力のための一連の設計された制限の酵素使用することができるプラスミッドの、ゲノムおよびウイルスDNA、またPCRプロダクトを消化するのにである。すべての酵素は普遍的な緩衝で優秀な活動を示したり、従って酵素の消化力の反作用システムを簡単にした。さらに、酵素は優秀な酵素の重複を提供し、基質の余分か困難な型板の容易な消化力を許可する。
船積みおよび貯蔵
部品はアイスパックによって出荷され、2年間-20°Cで貯えることができる。
場所の切断
5' - GGTCTC （N）1↓-3 '
3' - CCAGAG （N）5↑-5 '
推薦された反作用の状態
1× FuniCut™の緩衝;37℃で孵化させなさい。
熱不活性化
20 min.の80℃の孵化。
品質管理
1. 活動定義:1 μg pPIC9K DNAは20 μLの総反作用の容積の37℃の15分の酵素の1つのμLと完全に消化された。
2. 延長された孵化/星の活動の試金:ヌクレアーゼの汚染か星の活動に37℃に3時間FuniCut™ BsaIの1つのμLとの孵化の間による1 μg pPIC9K DNAの探索可能な低下は起こらなかった。より長い孵化は星の活動で起因するかもしれない。
3. LigationおよびRecleavage （L/R）試金:最適の条件の下で1μL酵素と消化されるの後で消化力からのプロダクトを22℃のT4 DNAのリガーゼの下で縛ることができるリサイクルしなさい。ligationプロダクトは酵素によってrecleavagedできる。
4. 無指定のEndonucleaseの活動:37℃の4時間1 μg supercoiledプラスミッドDNAが付いている1つのμLの酵素の孵化はsupercoiled状態の変更で起因しなかった。
指示
1. 別のDNAの速い消化力のための議定書
1.1順序で氷の次の反作用の部品が示したコンバイン:
| 部品 | プラスミッドDNA | PCRプロダクト | ゲノムDNA |
| ddH2O | 15 μL | 16 μL | 30 μL |
| 10×FuniCut™緩衝か10×FuniCut™色の緩衝 | 2 μL | 3 μL* | 5 μL |
| DNA | 2 μL （1つまでのμg） | 10 μL （約0.2のμg） | 10 μL （5 μg） |
| FuniCut™ BsaI | 1つのμL | 1つのμL | 5 μL |
| 合計 | 20 μL | 30 μL | 50 μL |
[ノート]:*Forによって浄化されるPCRプロダクト。10× FuniCut™の緩衝の量はunpurified PCRプロダクトの残りのイオン強さによる2 μLに減るかもしれない。PCRプロダクトは浄化されたPCRプロダクトがクローンとして作ることのために使用される時前の消化力であるために推薦された。
1.2穏やかの組合せ（ない渦をするため）および回転。
1.3 15分の（プラスミッドDNA）または15-30分の（PCRプロダクト）または30-60分の37℃で孵化させなさい（ゲノムDNA）。
1.4任意:80℃で20分の間熱することによって酵素を不活性にしなさい。
2. DNAの二重および多数の消化力
2.1各酵素の1つのμLを使用し、反作用の状態を適切に量りなさい。
2.2反応混合物の酵素の結合された容積は総反作用の容積の1/10を超過するべきではない。
2.3酵素が異なった反作用の温度を要求すれば、低温を要求する酵素との開始は、第2酵素を加え、高温で孵化する。
3. プラスミッドDNAの消化力の反作用の上の計量
| 部品 | 容積（20 μL） | 容積（20 μL） | 容積（50 μL） |
| DNA | 1つのμg | 2 μg | 5 μg |
| FuniCut™ XbaI | 1つのμL | 2 μL | 5 μL |
| 10× FuniCut™ Bufferor10× FuniCut™色の緩衝 | 2 μL | 2 μL | 5 μL |
| 合計 | 20 μL | 20 μL | 50 μL |
[ノート]:水サーモスタット、金属のサーモスタットまたは砂のサーモスタットの孵化。総反作用の容積が20 μLを超過したら孵化の時間を増加しなさい。
DNAの認識部位の数
| λDNA | ΦX174 | pBR322 | pUC57 | pUC18/19 | SV40 | M13mp18/19 | Adeno2 |
| 2 | 0 | 1 | 1 | 1 | 0 | 0 | 1 |
消化力に対するメチル化の効果
| ダム | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
| 効果無し | いつ重複するか妨げられる | いつ重複するか妨げられる | 効果無し | いつ重複するか妨げられる |
異なった緩衝の活動
| FuniCut™の緩衝 |
熱の科学 FastDigestの緩衝 |
くちばし CutSmart® 緩衝 |
Takara QuickCut™の緩衝 |
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| 活動 | 100% | 100% | 100% | 100% |
このについての質問が酵素BsaIあったら、親切に私達に知らせなさいありがとう
コンタクトパーソン: Ms Kris
電話番号: +8613049739311
