商品の詳細:
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製品名: | DNAのリガーゼ | 10299ES40: | 40,000 U |
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10299ES42: | 400,000 U | 10299ES83: | 1,600,000 U |
入れられたDNAのモル(pmol): | 入れられてDNA ([NGの)/0.66の×はDNA平均長さ(bpを入れた)] | 適用: | 研究の使用だけのため! |
ハイライト: | 400 U/UL T4 DNAのリガーゼ,研究T4 DNAのリガーゼ,T4 DNAのリガーゼの生化学的な試薬 |
速いT4 DNAのリガーゼ(400 U/ΜL)
速いT4 DNAのリガーゼはNGSの図書館の構造の過程においてDNAの片およびアダプターを接続するのに使用することができる単一の酵素プロダクトである。プロダクトは配列する高い効率によって確認され、優秀な質がある。この酵素に複雑な核酸の片の縛ることのために非常に適しているMGIのプラットホームのΩのアダプターのような非常に能率的な縛る能力がある。中心の部品がシステム調節を必要としない顧客のための速いT4 DNAのリガーゼであるHieff NGSTM Ultima DNAのLigationモジュール(Cat#12604)を選ぶことを推薦する。
製品名 | Cat# | サイズ |
速いT4 DNAのリガーゼ(400 U/ΜL) | 10299ES40 | 40,000 U |
10299ES42 | 400,000 U | |
10299ES83 |
1,600,000 U |
速いT4 DNAのリガーゼについての製品の説明
速いT4 DNAのリガーゼはNGSの図書館の構造の過程においてDNAの片およびアダプターを接続するのに使用することができる単一の酵素プロダクトである。プロダクトは配列する高い効率によって確認され、優秀な質がある。この酵素に複雑な核酸の片の縛ることのために非常に適しているMGIのプラットホームのΩのアダプターのような非常に能率的な縛る能力がある。Hieff NGSを選ぶことを推薦するTM中心の部品がシステム調節を必要としない顧客のための速いT4 DNAのリガーゼであるUltima DNAのLigationモジュール(Cat#12604)。
速いT4 DNAのリガーゼのプロダクト部品
構成数 | 部品 | Cat#/Size | ||
10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
10299-A | 速いT4 DNAのリガーゼ(400 U/ΜL) | 100 µL | 1つのmL | 4つのmL |
10299-B | 10 × T4 DNAのリガーゼの緩衝 | 250 μL | 5 × 500のμL | 10のmL |
指示
1. 現在の主流DNAの図書館の構造キットは終わり修理およびテーリングの処置の後で一般に浄化されないし、直接アダプターのligationを行う。反作用システムのための次の準備を参照しなさい。完全の渦は、20°C.で15分の間孵化するために簡潔に回り。
部品 | 容積(μL) |
dA後につかれたDNA | 60 |
10 × T4 DNAのリガーゼの緩衝 | 10 |
50%止め釘6000 | 10* |
DNAのアダプター | X** |
速いT4 DNAのリガーゼ(400 U/ΜL) | 15*** |
ddH2O | 100まで |
[ノート]:*50%止め釘6000はキット、でそれを独りで準備する必要がある提供されない。
**アダプターの量のための次のテーブルを参照しなさい。
***は使用される速いT4 DNAのリガーゼの量必要とされてように加えられた1-5 μLである場合もある。
2. 直接使用されるアダプターの質そして集中はligationの効率および図書館の収穫に影響を与える。たくさんのアダプターの使用法はより低い使用法はligationの効率および図書館の収穫に影響を与えるかもしれないがより多くのアダプターの二量体を作り出すかもしれない。次のテーブルはこのキットを使用して異なった入れられたDNAの状態で使用されるアダプターの推薦された量をリストしたものだ。
入れられたDNA |
アダプター:入れられたDNA (モルの比率) |
入れられたDNA |
アダプター:入れられたDNA (モルの比率) |
1つのμg | 10:1 | 50 NG | 100:1 |
500 NG | 20:1 | 25 NG | 200:1 |
250 NG | 40:1 | 1 NG | 200:1 |
100 NG | 100:1 | 500ページ | 400:1 |
[ノート]:入れられるDNAモル(pmol) ≈入ったDNA () [NGの/0.66の×によって入れられるDNA平均長さ(bp)]。
アダプターのligationの計算の例:入力DNAが100 NGの、長さが300 bpであるときどの位アダプターが加えられるべきであるか。
ステップ1:入力DNAのモルの数を計算しなさい。方式:入れられるDNAモル(pmol) ≈入ったDNA ([NGの)/0.66の×によって入れられるDNA平均長さ(bp)];入れられたDNAのモル(pmol) =100 ÷ (0.66×300) = 0.5 pmol;
ステップ2:上のテーブルに従って、加えられるアダプターのモルの数を計算しなさい。;入れられたDNAが100ngである時、アダプターのモルの比率:入力DNAはアダプターadded=100×0.5 pmol=50のpmolのモルの100:1および数である;
ステップ3:アダプターの付加の容積を計算しなさい。アダプターの集中= 15 μmol/L (他の会社のアダプターを使用すれば、指示に従って集中を定める必要がある);加えられたアダプターの容積は=アダプターのモル(アダプター(15 μmol/L) = 3.34 μL加えた(ノートの50 pmolの) ÷の集中を:15 μmol/L = 15 pmol/のμL);
要約すると、アダプターが加えることができる容積は3.4 μLである。(ノート:アダプターの最高の付加の容積は5 μLを超過しない)。
プロダクトはアイスパックによって出荷され、2年間-20°Cで貯えることができる。
単位定義
20のμLのligationの反作用システムでは、λDNA後部の6 μgが30Ⅲ分の16℃で反応するとき、DNAの片の50%以上ligationを与えるために必要な酵素の量は1単位(u)と定義された。
注意
1. T4 DNAのリガーゼは物理的な変性に敏感である。混合した場合、穏やかに管を逆にし、よく揺すりなさい。活発に揺すってはいけない;
2. 酵素は冷蔵庫でまたは氷浴で使用されたとき貯えられ、使用の直後の-20°Cで貯えられるべきである;
3。このプロダクトは研究の使用だけのためである!
4。あなたの安全衞生のために、操作のための実験室のコートそして使い捨て可能な手袋を身に着けなさい。
この速いT4 DNAのリガーゼ(400 U/ΜL)についてのより多くの情報を必要としたら、私達と連絡しなさい、ありがとう
コンタクトパーソン: Ms Kris
電話番号: +8613049739311